Ein Multiplex-Assay zur Beurteilung von aktiviertem p300/CBP in zirkulierenden Prostatatumorzellen

Eine neue Forschungsarbeit wurde veröffentlicht in Oncotargetmit dem Titel „Entwicklung eines Multiplex-Assays zur Beurteilung von aktiviertem p300/CBP in zirkulierenden Prostatatumorzellen.“

Eine verringerte SIRT2-Deacetylierung und eine erhöhte p300-Acetylierungsaktivität führen zu einem konzertierten Mechanismus der Hyperacetylierung an bestimmten Histon-Lysin-Stellen (H3K9, H3K14 und H3K18) bei kastrationsresistentem Prostatakrebs (CRPC). In dieser neuen Studie untersuchten die Forscher Mikolaj Filon, Bing Yang, Tanaya A. Purohit, Jennifer Schehr, Anupama Singh, Marcelo Bigarella, Peter Lewis, John Denu, Joshua Lang und David F. Jarrard von der University of Wisconsin, ob zirkulierende Tumorzellen (CTCs) Patienten mit veränderter p300/CBP-Acetylierung identifizieren.

„In der aktuellen Studie haben wir mithilfe einer neuartigen ESP-Technologie (Exclusion-based Sample Prepared) (9) zur Isolierung von CTCs die p300-Aktivität, die SIRT2-Expression und die H3K18-Acetylierung in CTCs bei einer Reihe von Patienten mit Empfindlichkeit oder Resistenz gegenüber ADT untersucht“, sagen die Forscher.

CTCs wurden von 13 fortgeschrittenen PC-Patienten mithilfe der ESP-Technologie (Exclusion-based Sample Prepared) isoliert. Gebundene Zellen wurden einer Immunfluoreszenzfärbung auf interessierende histonmodifizierende Enzyme (HMEs) und einer Bilderfassung mit der NIS-Elements-Software unterzogen. Mithilfe des cBioPortal PCF/SU2C-Datensatzes wurde die Reaktion von CRPC auf Androgenrezeptor-Signalinhibitoren (ARSI) bei 50 Probanden analysiert.

Die Optimierung und Spezifität der Färbung ergab eine klare Expression von Acetyl-p300, Acetyl-H3K18 und SIRT2 auf CTCs (CK-positive, CD45-negative Zellen). Die Exposition gegenüber A-485, einem selektiven katalytischen p300/CBP-Inhibitor, verringerte die Acetylierung von p300 und H3K18. Bei CRPC-Patienten korrelierte a-p300 stark mit seinem acetylierten Zielmolekül H3k18 (Pearson’s R = 0,61) und die SIRT2-Expression zeigte eine robuste negative Korrelation mit a-H3k18 (R = −0,60).

Eine Untergruppe von CRPC-Patienten (6/11; 55 %) zeigte basierend auf diesen Markern eine konsistente Hochregulierung der Acetylierung. Um die klinischen Auswirkungen einer Hochregulierung der CBP/p300-Achse zu untersuchen, zeigten CRPC-Patienten mit reduzierter Deacetylase-SIRT2-Expression kürzere Reaktionszeiten auf die ARSI-Therapie (5,9 vs. 12 Monate; p = 0,03). Eine Untergruppe von CRPC-Patienten zeigt eine erhöhte p300/CBP-Aktivität basierend auf einem neuartigen CTC-Biomarker-Assay.

„Mit der Weiterentwicklung könnte diese Biomarker-Suite dazu verwendet werden, Kandidaten für CBP/p300-Acetylierungsinhibitoren in der klinischen Entwicklung zu identifizieren“, schließen die Forscher.

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